שאלות נפוצות לגבי התקני סינון צנטריפוגליים

Q1. יש צורך להפריד בין חלבונים במשקלים מולקולריים שונים, אז כמה הבדל צריכים המשקלים המולקולריים של החלבונים?

ת: הגודל של שני החלבונים צריך להיות שונה פי 10 או יותר.

 

Q2. יכול לצנטריפוגהאלמכשירי סינון יהיו מעוקרים ועמידים בפני שטיפה אלקלית?

ת: ניתן לעקר אותו עם תמיסה מימית של 75 אחוז אתנול, והממברנה יכולה לעמוד בשטיפה של 0.1-0.5N נתרן הידרוקסיד אלקלי.

 

Q3. איך להתמודד עם אם החלבון ירד במהלך הריכוז?

ת: אם החלבון מרוכז מהר מדי או מרוכז מדי, הוא עלול לגרום למשקעי חלבון, והריכוז הסופי של החלבון לאחר הריכוז לא צריך להיות גבוה מדי; חלבונים שרגישים לקצב ריכוז ונוטים להחדיר, שיטת שיפורים מוצעת:

הפחת את המהירות הצנטריפוגלית

השתמש בממברנת סינון אולטרה עם חתך משקל מולקולרי גבוה יותר

נשוף ומוצץ את הצינור המרוכז ולאחר מכן צנטריפוגה

 

Q4. מהי הסיבה האפשרית לכך שמכשירי סינון צנטריפוגלייםלא ניתן לצנטריפוגה למטה?

ת: אתה יכול להשתמש בתמיסה מימית אתנול של כ-20 אחוז לצנטריפוגה ראשונית אם לא ניתן לצנטריפוגה את צינור האולטרה סינון, מכיוון שממברנת האולטרה סינון יבשה לחלוטין, פני הממברנה הידרופוביים בצורה חלשה, וניתן להחזיר את השטף לאחר הסתננות עם חום נמוך. ממס מתח פני השטח.

 

Q5. שיטות שימוש נכונות ואחסון של התקני סינון צנטריפוגליים

ת: יש לצנטרל את מכשירי המסנן הצנטריפוגלי עם מים מטוהרים לפני השימוש כדי לוודא את תקינותם. לאחר כל שימוש, יש לאחסן אותו במצב רטוב כדי למנוע את התייבשות הממברנה.

 

Q6. כיצד מכשירי המסנן הצנטריפוגלי מסירים אנדוטוקסין?

ת: מכשירי המסנן הצנטריפוגליים שסיפקנו לא טופלו באנדוטוקסינים, ומכיוון שאנדוטוקסינים קיימים בטבע, ניתן לנקות מראש דגימות הדורשות אנדוטוקסינים עם 0.5N נתרן הידרוקסיד לפני הניסוי, ולאחר מכן לשטוף עם מים RO להסרת רוב האנדוטוקסין.

 

Q7. כאשר משתמשים בחלבון המרוכז לניתוח במורד הזרם, נמצא שיש הפרעה, מה הסיבה?

ת: ניתן לשטוף מראש את מכשירי המסנן הצנטריפוגלי עם תמיסת חיץ או מים מטוהרים. אם ההפרעה עדיין קיימת, שטפו עם 0.1N נתרן הידרוקסיד, ולאחר מכן שטפו במים מטוהרים.

 

Q8. It נמצא שאין חלבון מטרה בתרכיז לאחר ריכוז. מהן הסיבות האפשריות?

ת: 1) הריכוז הראשוני של החלבון לא צריך להיות נמוך מדי, אם הריכוז נמוך מדי, ייתכן שהממברנה לא תוכל להישמר.

2) בחר את גודל הנקבוביות המתאים של הממברנה. הריכוז הצנטריפוגלי של צינור המסנן שייך לסינון ללא מוצא, וגודל נקבוביות הממברנה הוא בדרך כלל פחות מפי 2 או יותר מחלבון היעד.

3) בחר את המהירות הצנטריפוגלית הנכונה

4) האם חלבון היעד משקע

 

Q9. טיפול פסיבי במכשירי סינון צנטריפוגליים

ת: טיפול מקדים בפסיבציה של פני השטח של מכשירי המסנן הצנטריפוגלי יכול להפחית את אובדן הספיחה של חלבון על פני הממברנה, ברוב המקרים, טיפול מקדים של העמודה לפני ריכוז תמיסת החלבון המדוללת יכול לשפר את ההתאוששות, מכיוון שהתמיסה יכולה למלא את החשוף אתרי ספיחת חלבון ריקים על הממברנה והמשטח, שיטת הפסיבציה היא להשרות מראש את העמוד עם נפח גבוה של תמיסת פסיבציה למשך יותר משעה, לשטוף את העמוד ביסודיות במים מזוקקים, ולאחר מכן לצנטרל את העמוד פעם אחת במים מזוקקים כדי להסיר לחלוטין את תמיסת הפסיבציה שעלולה להישאר על הממברנה, היזהר לא לתת לממברנה להתייבש לאחר הפסיבציה, אם ברצונך לשמור אותה לשימוש עתידי, עליך להוסיף מים מזוקקים סטריליים כדי לשמור על הממברנה רטובה., אנא צור קשר המהנדסים שלנו לפתרונות פסיביות נפוצים.

 

Q10. האם ממברנת האולטרה-פילטרציה מסננת את המולקולות בצורה היררכית?

A: Generally speaking, if the dead-end filtration method is used, it is difficult to accurately remove small molecules among several large molecules by ultrafiltration method. This is because the membrane is a porous network structure, and its filtration mechanism is based on retention rather than passage, such as, the cut off rate of molecules larger than 100kd is >95 אחוז אם משתמשים בממברנת אולטרה-פילטרציה של 100kd, לעומת זאת, מולקולות קטנות מגודל הנקבוביות של הממברנה אינן עוברות לחלוטין דרך הממברנה בחופשיות. קצב השמירה המולקולרית של 67kd הוא יותר מ-70 אחוז, והחלבון של 43kd גם מנותק ביותר מ-40 אחוז, הרכיבים השונים בתמיסה מעורבת עוברים דרך הממברנה לא פשוטים וקלים כמו תמיסה של רכיב בודד, בפועל , אם אתה רוצה לבודד שתי מקרומולקולות, הפרש המשקל המולקולרי ביניהן צריך להיות פי שמונה או יותר.

 

Q11. כיצד להפריד ביעילות מולקולות גדולות וקטנות באמצעות סינון אולטרה?

ת: עקב צורכי התהליך מסירים את הזיהומים במקרומולקולות, או מסירים את המולקולות הקטנות מהמקרומולקולות, זה תקין בייצור. יש צורך מאוד לבחור את גודל נקבוביות הממברנה המתאים, שיטת הסינון ותנאי ההפעלה. באופן כללי, אם מפרט MWCO של הממברנה נבחר בין שני החלבונים, ניתן להשיג הפרדה אידיאלית יחסית. אם תמיסת החלבון מדוללת יחסית, הפעלה בלחץ נמוך גם תעזור להשיג תוצאות טובות יותר. בחר סינון זרימה משיקית ובצע דיאפילטרציה מרובה כדי לקבל אפקט הפרדה טוב יותר.